酶切位点保护碱基怎么加（引物保护是啥）

酶切位点保护碱基怎么加

如果要加在序列的5'端，就在酶切位点识别碱基序列（红色）的5'端加上相应的碱基（黑色），相同如果要在3'端加保护碱基，就在酶切位点识别碱基序列（红色）的3'端加上相应的碱基（黑色），切割率：正确识别并酶切的效率。

加保护碱基时最好选用切割率高时加的相应碱基。

ecorv保护碱基是什么

1、保护碱基 限制性内切酶识别特定的DNA序列，除此之外，酶蛋白还要占据识别位点两边的若干个碱基，这些碱基对内切酶稳定的结合到DNA双链并发挥切割DNA作用是有很大影响的，被称为保护碱基。

2、 在分子克隆实验中，有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点，用于后续的酶切和连接反应。

3、由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开，因此在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘

4、端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性。

5、 其次，在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时，相临的两个酶切位点往往不能同时使用，因为一个位点切割后留下的碱基过少以至于影响旁边的酶切位点切割。

引物保护是啥

在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性。